酶聯(lián)生物抗體的選擇對(duì)策
更新時(shí)間:2023-03-20 點(diǎn)擊次數(shù):664
分析您的試驗(yàn)應(yīng)用的類(lèi)型
一般抗體說(shuō)明書(shū)都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過(guò)適用于何種分析類(lèi)型,如:可以應(yīng)用于WB IHC ICC ELASA分析等,如果抗體說(shuō)明書(shū)沒(méi)有提及的應(yīng)用類(lèi)型。
并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類(lèi)型,而僅是說(shuō)明尚未經(jīng)過(guò)此種分析試驗(yàn)驗(yàn)證,如果抗體不適用某些分析試驗(yàn),則會(huì)在抗體說(shuō)明書(shū)上標(biāo)注出來(lái)不適于某分析試驗(yàn)。
樣本的物種
應(yīng)選擇物種相同或有交叉反應(yīng)的抗體,抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應(yīng),因其氨基酸序列同源性較高,如果樣本的種類(lèi)未列入抗體說(shuō)明書(shū)上的交叉反應(yīng)種屬表中。
并不意味著該抗體不適用于檢測(cè)該物種的蛋白,而只是表示該物種尚未用此抗體檢測(cè)驗(yàn)證過(guò),應(yīng)通過(guò)序列比對(duì)的方法來(lái)預(yù)測(cè)交叉反應(yīng),可應(yīng)用Expasy 和 NCBI BLAST來(lái)進(jìn)行不同物種蛋白同源性比對(duì)。
雙重染色抗體的選擇
用未偶聯(lián)一抗進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來(lái)源于不同物種并且二抗分別識(shí)別其中之一,二抗說(shuō)明書(shū)應(yīng)描述其與其它物種來(lái)源的免疫球蛋有否有交叉吸附。